Knudson-medium til orkideer

Knudson-medium er et kunstigt næringsmedium udviklet i 1946 af den amerikanske botaniker Lewis Knudson til at spire orkidéfrø og fremme vækst under sterile forhold. Det er et af de mest anvendte medier til dyrkning af orkideer in vitro og er populært til både laboratorie- og hjemmebrug.

Hvad er Knudson-mediet?

Orkideer vokser naturligt i symbiose med mykorrhiza-svampe, som leverer essentielle næringsstoffer. Det er dog umuligt at reproducere denne symbiose under laboratorieforhold. Knudson-medium blev udviklet som en næringsrig erstatning, der leverer alle de essentielle elementer, der er nødvendige for frøspiring og kimplantevækst.

Sammensætning af Knudson-medium

Standardformlen inkluderer:

• Sukker: en primær energikilde.
• Mineralsalte:
  • Kaliumnitrat (kno₃) – en nitrogenkilde.
  • Magnesiumsulfat (mgso₄) – leverer magnesium og svovl.
  • Kaliumdihydrogenfosfat (kh₂po₄) – leverer fosfor og kalium.
  • Calciumchlorid (cacl₂) – en kilde til calcium.
• Vitaminer:
  • Nikotinsyre, thiamin og pyridoxin aktiverer metaboliske processer.
  • Jern, zink, mangan og andre elementer, der er essentielle for vævsudvikling.
  • Agar-agar for at skabe et fast medium, der forhindrer frø eller kimplanter i at synke.
• Sporstoffer:
• Geleringsmidler:

Fordele ved at bruge Knudson-medium

1. Stimulerer frøspiring:
   • Giver alle nødvendige næringsstoffer til spiring og erstatter behovet for svampesymbiose.
2. Sterilt miljø:
   • Skaber ideelle vækstbetingelser uden risiko for bakterie- eller svampekontaminering.
3. Optimale vækstbetingelser:
   • Understøtter kimplanternes udvikling, indtil de er klar til omplantning i et substrat.
4. Velegnet til forskellige orkidéarter:
   • Formlen kan justeres for at imødekomme de specifikke behov hos forskellige orkidetyper.

Anvendelser af Knudson-medium

1. Frøspiring:
   • Orkidéfrø steriliseres (normalt med natriumhypochloritopløsning).
   • Sterile frø placeres på overfladen af næringsmediet i petriskåle eller reagensglas.
2. Frøplantevækst:
   • Mediet understøtter kimplanternes udvikling, indtil blade og de første rodsystemer fremkommer.
3. Transplantation i substrat:
   • Når kimplanterne når en passende størrelse, transplanteres de til et passende substrat (f.eks. bark, sphagnummos).

Hvordan tilbereder man Knudson-medium?

Ingredienser (eksempel for 1 liter):

• Agar-agar: 10 g
• Sukker: 20 g
• Kh₂po₄: 250 mg
• Mgso₄·7t₂o: 250 mg
• Cacl₂·2t₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitaminer (thiamin, nikotinsyre): 1 mg pr. stk.
• Mikroelementer (f.eks. feso₄): 1-2 mg
• Destilleret vand: 1 l

Trin:

1. Opløs alle komponenter i destilleret vand.
2. Tilsæt agar-agar og varm op, indtil det er helt opløst.
3. Hæld opløsningen i sterile beholdere (petriskåle, reagensglas).
4. Steriliser mediet i en autoklave eller et vandbad (15 minutter ved 121 °C).
5. Afkøl mediet for at lade det størkne.

Tips til brug af Knudson-medium

1. Oprethold sterilitet:
   • Arbejd under sterile forhold for at forhindre kontaminering.
2. Overvåg temperatur:
   • Opbevar kulturerne ved +20-25 °C.
3. Sørg for tilstrækkeligt lys:
   • Sørg for blød, diffus belysning i 12-14 timer dagligt.
4. Omplantning:
   • Overfør frøplanterne til et substrat, når de er store nok til uafhængig vækst.

Konklusion

Knudson-medium er et vigtigt værktøj til succesfuld spiring af orkidéfrø og dyrkning af sunde kimplanter. Det giver den perfekte balance af næringsstoffer til vækst, hvilket eliminerer behovet for svampesymbiose. Dette medium er ideelt til formering af sjældne og dekorative orkidéarter, uanset om det er i et laboratorium eller derhjemme.